醋酸甲酯、環(huán)己烷、甲醇等混合樣品的色譜測定

醋酸甲酯、環(huán)己烷、甲醇等混合樣品的色譜測定
[目的要求]
1、進(jìn)一步掌握色譜定量分析的原理
2、了解校正因子的含義，用途和測定方法
3、學(xué)會面積歸一化定量方法
[基本原理]
色譜定量分析的依據(jù)是，在一定條件下，被測物質(zhì)的重量w與檢測器的響應(yīng)值成正比，即：Wi=Fi Ai
或：Wi=Fih hi
Ai：被測組分的峰面積；hi：被測組分的峰高；Fi：比例常數(shù)（以峰面積表示時）
Fih：比例常數(shù)（以峰高表示時）
所以定量時需要：
（1）準(zhǔn)確測量響應(yīng)信號A或h。
A或h是基本的定量數(shù)據(jù)，h可以直接測得，A和其他參數(shù)計算求得。
如：A=1.065hW1/2
（2）準(zhǔn)確求得校正因子F
響應(yīng)值除正比于組分含量外，與樣品的性質(zhì)也有關(guān)，即在相同的條件下，數(shù)量相等的不同物質(zhì)產(chǎn)生的信號的大小可能不同。因此，在進(jìn)行定量分析時需加以校正。
由前述可知：—即單位峰面積所代表的樣品重量，由于受操作條件影響較大，F(xiàn)的測定較困難。所以在實(shí)際操作中都采用相對校正因子f′。f′為組分i和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)s的校正因子之比：

Wi、Ws分別為待測物和標(biāo)準(zhǔn)物之重量；As、Ai分別為待測物和標(biāo)準(zhǔn)物之峰面積。
f′與檢測器類型有關(guān)，而與檢測器結(jié)構(gòu)特性及操作條件無關(guān)。
因物質(zhì)的量可以用重量或摩爾表示，故：
（相對重量校正因子）
（相對摩爾校正因子）
其中Mi，Ms——分別為待測物和標(biāo)準(zhǔn)物的分子量
f′、f可以從文獻(xiàn)查得，亦可直接測量。準(zhǔn)確稱量一定重量的待測物質(zhì)和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，混勻后進(jìn)樣，分別測得峰面積，即可求其校正因子。
（3）選擇合適的定量方法
常用的定量方法有好多種，本實(shí)驗(yàn)采用歸一法。
歸一法就是分別求出樣品中所有組分的峰面積和校正因子，然后依次求各組分的百分含量。
歸一法優(yōu)點(diǎn)：簡潔；進(jìn)樣量無需準(zhǔn)確；條件變化時對結(jié)果影響不大。
缺點(diǎn)：混合物中所有組分必須全出峰；必須測出所有峰面積。
[儀器試劑]
氣相色譜儀（附TCD、FID）；微量注射器：1 μL、5 μL；
三組分混合樣：甲醇，醋酸甲酯，環(huán)己烷
[色譜條件]
色譜柱：GDX-102(60—80目)。
溫度：Tc——100-120℃；TD——150℃；Ti——150℃
載氣：H2 45 mL/min；N2 50 mL/min；空氣400 mL/min
紙速：5 cm/min；衰減：自選
[實(shí)驗(yàn)步驟]
按上述條件開機(jī)調(diào)試，待儀器穩(wěn)定后依次進(jìn)行。
1、定性分析
（1）調(diào)記錄紙速為5 cm/min，用1 μL注射器進(jìn)分別進(jìn)甲醇，醋酸甲酯，環(huán)己烷0.1μL，記錄色譜圖，準(zhǔn)確測量各峰的保留時間（tR）。
（2）在相同條件下進(jìn)0.1 μL—0.2 μL三組分混合樣記錄色譜圖，準(zhǔn)確測量各峰的保留時間（tR）。
2、測量校正因子
于分析天平上準(zhǔn)確稱取三標(biāo)準(zhǔn)試樣與同一小瓶中混勻，在設(shè)定的條件下進(jìn)樣0.1 μL—0.2 μL，記錄峰面積。
3、定量分析
進(jìn)0.1 μL—0.2 μL未知混合樣。記錄色譜圖，測量峰面積。
4、關(guān)機(jī)。
[數(shù)據(jù)處理]
1、根據(jù)保留時間確定各峰歸屬。
2、根據(jù)所稱標(biāo)樣重量和各峰面積，計算相對校正因子（以甲醇為標(biāo)準(zhǔn)物）。
3、根據(jù)未知樣品中峰面積，用歸一化法計算待測樣品中各組分的百分含量
[思考題]
1、歸一化法使用的條件是什么？
2、如何求校正因子？在什么條件下可以不考慮校正因子？